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丁真说:样本应该这样取材和保存!

3.1动物组织样本

① 1-3min内取样,取样组织2mmX2mm大小,尽量薄。如来不及修整组织大小可先于电镜固定液内固定半小时左右待组织变硬以后再修整组织进行后固定。超出此范围后组织会无法完全固定,后续实验无法完成,务必请重视此过程。

② 取材时尽量精确到需要观察的目的部位(如观察肾小球取肾皮质;观察胰岛取胰岛丰富的胰尾;皮肤,肠胃等在固定液中易打卷的组织可将组织粘在滤纸上进行固定)。

③ 取材时一定注意避免镊子挤压等机械损伤,刀片要锋利避免挫伤组织。

④ 组织取下后立即投入电镜固定液内室温固定2h,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。4℃时样本可保存1个月左右。

3.2细胞样本

贴壁细胞:实验目的重点观察细胞连接,将培养好的细胞弃培养基不经漂洗迅速加电镜固定液用细胞刮沿一个方向轻轻刮下细胞收集到离心管内(避免刮破细胞)。实验目的重点观察细胞器,对细胞形态形状无特殊要求,用胰酶消化,离心收集细胞要肉眼可见细胞沉淀芝麻至绿豆大小,弃固定液后加新的电镜固定液室温固定2h,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

悬浮细胞:离心收集细胞要肉眼可见细胞沉淀芝麻至绿豆大小,弃培养基后加电镜固定液室温固定2h,再转移至4℃保存,4℃冰袋运输,在保存和运输过程中固定液切勿冷冻结冰。

四、生化实验

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